Protocole de l’étude
#Jour I
→ Toujours identifier correctement les tubes et boîtes (initiales, n° poste, n° d’expérience).
Matériel :
- 2 Bouillons Nutritifs (BN) stériles.
- 2 tubes d’eau distillée stériles.
- 2 Géloses Nutritives (GN).
Manipulation :
T1. Vérification de l’efficacité de la décontamination de l’anse
- A l’aide d’une anse non stérilisée, transférer 1 goutte d’eau stérile sur une petite GN, puis effectuer des stries sur la gélose sans l'érafler.
- A l’aide d’une anse préalablement stérilisée, transférer 1 goutte d’eau stérile sur une autre petite GN, puis effectuer des stries sur la gélose sans l'érafler.
Toutes les manipulations sont à réaliser en respectant les consignes indiquées dans la fiche “Le poste de travail en microbiologie”.
T2. Vérification de l’efficacité de la décontamination de la pipette Pasteur
- Avec une pipette Pasteur non stérile, transférer 3 gouttes d’eau stérile dans un BN stérile.
- Avec une pipette Pasteur stérile, transférer 3 gouttes d’eau stérile dans un autre BN stérile.
→ Incuber les bouillons nutritifs et les géloses nutritives à 37°C.
Compte rendu :
Q1. A l’aide d’un organigramme présenter les manipulations effectuées.
Q2. Rechercher la définition des mots en gras et soulignés dans les expressions « environnement aseptique » et « manipulation stérile ».
#Jour II
Manipulation :
T3. Observer l’aspect des milieux de culture après leur incubation à 37°C.
Données :
- Tube de BN sur la paillasse latérale avec une culture microbienne : témoin +
- Tube de BN sur la paillasse latérale stérile : témoin –
- Une multiplication bactérienne sur un milieu nutritif solide se manifeste par l’apparition de colonies.
Compte rendu :
Q3. Présenter dans un tableau les résultats obtenus et conclure pour chaque résultat.
Q4. Évaluer la qualité des manipulations réalisées en conditions aseptiques.