Fiche : La coloration de GRAM
La coloration de Gram a été développée en 1883 par un médecin danois Christian Gram. Elle permet de distinguer deux groupes de bactéries :
- Les bactéries Gram + qui sont de couleur violette.
- Les bactéries Gram – qui sont de couleur rose.
GRAM -
Escherichia coli
GRAM +
Staphylococus epidermidis
| Étapes de la coloration de GRAM |
|---|
| 1. Coloration au violet de gentiane |
| ⇨ Plonger la lame dans la solution de violet de gentiane pendant 30 secondes. |
| 2. Renforcement de la coloration par le lugol |
| ⇨ Recouvrir la lame de lugol pendant 30 secondes puis rincer à l’eau distillée. |
| 3. Décoloration |
| ⇨ Recouvrir la lame d’éthanol pendant 5 à 7 secondes (ou jet d’éthanol) et rincer rapidement à l’eau distillée le dessus et le dessous de la lame. |
| 4. Coloration à la fuschine |
| ⇨ Plonger la lame dans la solution de fuschine pendant 1 minute puis rincer à l’eau distillée. |
| 5. Séchage et observation |
| ⇨ Sécher le frottis coloré entre deux feuilles de papier filtre sans frotter. |
| ⇨ Observer à l’objectif x100 en présence d’une goutte d’huile à immersion. Augmenter la luminosité. |